制备辣根过氧化物酶(HRP)半抗原标记物的简单介绍
西安齐岳生物提供辣根过氧化物酶(HRP)标记前列腺素E2、前列腺素A2、氯磺隆、胆固醇、地塞米松、雌二醇、孕酮、生育酚、维生素B6、维生素A、胆钙化醇、麦角钙化甾醇、烟酸、黄素单核苷酸、核黄素、石杉碱甲、新橙皮苷二氢查尔酮、重楼皂苷、松香酸、香草酸、汉黄芩苷、辣椒碱、辣椒素、胆红素、芦丁、齐墩果酸等小分子**。
过氧化物酶HRP是什么?
过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP),通常来源于辣根(因此称辣根过氧化物酶),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同功酶组成,分子量为40,000,等电点为pH3~9 ,酶催化的适合PH因供氢体不同而稍有差异,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的硫酸铵溶液。用半抗原**与酶偶联、制备半抗原酶标记物时,通常要求半抗原与酶的克分子比率在10左右。比率过高,会导致复合物中酶含量降低,因而削弱检测信号强度。相反,如果比例过低 ,也会因空间屏蔽作用阻碍酶标半抗原与抗体的免疫反应而降低测定的灵敏度。
辣根过氧化物酶标记方法
酶标记抗体的制备方法主要有两种,即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。
辣根过氧化物酶的标记常用过碘酸盐氧化法,这种方法法只适用于含糖量较高的酶。过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基,醛基与抗体分子上的氨基形成Schiff碱而结合。后者可进一步用NaBH (或乙醇胺)还原生成稳定的酶标记抗体。
HRP的NalO4标记法.
原理: HRP为一种糖蛋白(glycoprotein), 其所带的糖基上的糖环能被氧化开环,在2,3-位的一C-C-断开。在适当的氧化条件下,2, 3-位羟基能被氧化为醛基。醛基在碱性条件下可与被标记物的自由氨基(-NH2)形成Shiff碱(-N=CH-), Shiff 碱不稳定,可由逆反应解离。Shiff 碱可由还原剂还原成一CH2一NH一,在HRP与被标记物间形成稳定的共价交联oHRP的NalO4标记法所用氧化剂为NalO4,还原剂采用NaBH4。
为了防止HRP的过度氧化,在整个标酶的过程中应尽量避光。光照可加快过碘酸钠对HRP糖基的氧化,如在标记过程中不避光,则不可控因素太多。
以下是部分产品列表:
地塞米松耦合辣根过氧化物酶 | Hydrocortisone-Peroxidase Conjugate(Hydrocortisone-HRP) |
氢化可的松标记辣根过氧化物酶 | Estradiol-Peroxidase Conjugate(Estradiol-HRP) |
雌二醇修饰辣根过氧化物酶 | Testosterone-Peroxidase Conjugate(Testosterone-HRP) |
睾酮-辣根过氧化物酶标记物 | Testosterone-Peroxidase Conjugate(Testosterone-HRP) |
孕酮-辣根过氧化物酶 | Tocopherol-Peroxidase Conjugate(Tocopherol-HRP) |
辣根过氧化物酶标记生育酚 | Vitamin B6-Peroxidase Conjugate(Vitamin B6-HRP) |
辣根过氧化物酶标记维生素B6 | Vitamin A-Peroxidase Conjugate(Vitamin A-HRP) |
维生素A-辣根过氧化物酶标记物 | Cholecalciferol -Peroxidase Conjugate(Cholecalciferol-HRP) |
辣根过氧化物酶胆钙化醇耦合物 | Niacin-Peroxidase Conjugate(Niacin-HRP) |
烟酸-辣根过氧化物酶标记物 | Flavin Mononucleotide-Peroxidase Conjugate(FMN-HRP-HRP) |
黄素单核苷酸现金辣根过氧化物酶 | Riboflavin-Peroxidase Conjugate(Riboflavin-HRP) |
辣根过氧化物酶标记核黄素 | Pyrene-Peroxidase Conjugate(Pyrene-HRP) |
芘-辣根过氧化物酶标记物 | Chrysene-Peroxidase Conjugate(Chrysene-HRP) |
屈-辣根过氧化物酶标记物 | Fluorene-Peroxidase Conjugate(Fluorene-HRP) |
芴-辣根过氧化物酶标记物 | Huperzine-Peroxidase Conjugate(Huperzine-HRP) |
石杉碱甲-辣根过氧化物酶标记物 | Neohesperidin dihydrochalcone-Peroxidase Conjugate(Neohesperidin dihydrochalcone-HRP) |
新橙皮苷二氢查尔酮标记辣根过氧化物酶 | Polyphyllin-Peroxidase Conjugate(Polyphyllin-HRP) |
重楼皂苷-辣根过氧化物酶标记物 | Abietic Acid-Peroxidase Conjugate(Abietic Acid-HRP) |
松香酸偶联辣根过氧化物酶标记物 | Vanillic Acid-Peroxidase Conjugate(Vanillic Acid-HRP) |
香草酸-辣根过氧化物酶标记物 | Wogonoside-Peroxidase Conjugate(Wogonoside-HRP) |
汉黄芩苷修饰辣根过氧化物酶 | Capsaicin-Peroxidase Conjugate(Capsaicin-HRP) |
辣椒碱-辣根过氧化物酶标记物 | Vanillylnonanamide-Peroxidase Conjugate(Vanillylnonanamide-HRP) |
辣椒素耦合辣根过氧化物酶 | Bilirubin-Peroxidase Conjugate(Bilirubin-HRP) |
胆红素-辣根过氧化物酶标记物 | Rutin-Peroxidase Conjugate(Rutin-HRP) |
芦丁-辣根过氧化物酶标记物 | Oleanolic Acid-Peroxidase Conjugate(Oleanolic Acid-HRP) |
辣根过氧化物酶标记齐墩果酸 | Aristolochic Acid-Peroxidase Conjugate(Aristolochic Acid-HRP) |
青蒿素功能化辣根过氧化物酶 | Liquidambaric Acid -Peroxidase Conjugate(Liquidambaric Acid-HRP) |
马兜铃酸-辣根过氧化物酶标记物 | Betulinic Acid-Peroxidase Conjugate(Betulinic Acid-HRP) |
路路通酸-辣根过氧化物酶标记物 | Cyclopamine-Peroxidase Conjugate(Cyclopamine-HRP) |
桦木酸修饰辣根过氧化物酶 | Aescin-Peroxidase Conjugate(Aescin-HRP) |
环巴胺-辣根过氧化物酶标记物 | Podophyllotoxin -Peroxidase Conjugate(Podophyllotoxin-HRP) |
辣根过氧化物酶标记七叶皂苷 | Resveratrol-Peroxidase Conjugate(Resveratrol-HRP) |
鬼臼毒素-辣根过氧化物酶标记物 | Curcumin-Peroxidase Conjugate(Curcumin-HRP) |
白藜芦醇耦合辣根过氧化物酶 | Puerarin-Peroxidase Conjugate(Puerarin-HRP) |
姜黄素-辣根过氧化物酶标记物 | Genistin-Peroxidase Conjugate(Genistin-HRP) |
葛根素-辣根过氧化物酶标记物 | Senegenin-Peroxidase Conjugate(Senegenin-HRP) |
染料木苷标记辣根过氧化物酶 | Polygalacic Acid-Peroxidase Conjugate(Polygalacic Acid-HRP) |
远志皂苷元标记辣根过氧化物酶 | Neogambogic Acid-Peroxidase Conjugate(Neogambogic Acid-HRP) |
远志酸-辣根过氧化物酶标记物 | Gambogic Acid-Peroxidase Conjugate(Gambogic Acid-HRP) |
新藤黄酸修饰辣根过氧化物酶 | Rosmarinic Acid -Peroxidase Conjugate(Rosmarinic Acid-HRP) |
藤黄酸-辣根过氧化物酶标记物 | Carnosic Acid -Peroxidase Conjugate(Carnosic Acid-HRP) |
辣根过氧化物酶标记迷迭香酸 | Demethylzeylasteral-Peroxidase Conjugate(Demethylzeylasteral-HRP) |
鼠尾草酸修饰辣根过氧化物酶 | Andrographolide-Peroxidase Conjugate(Andrographolide-HRP) |
去甲泽拉木醛-辣根过氧化物酶标记物 | Paeoniflorin-Peroxidase Conjugate(Paeoniflorin-HRP) |
辣根过氧化物酶标记修饰阿魏酸 | Ferulic Acid-Peroxidase Conjugate(Ferulic Acid-HRP) |
芍药苷-辣根过氧化物酶标记物 | Lithospermic Acid-Peroxidase Conjugate(Lithospermic Acid-HRP) |
辣根过氧化物酶标记阿魏酸 | Boswellic Acid-Peroxidase Conjugate(Boswellic Acid-HRP) |
辣根过氧化物酶标记紫草酸 | Epibetulinic Acid-Peroxidase Conjugate(Epibetulinic Acid-HRP) |
辣根过氧化物酶标记乳香酸 | Theophylline-7-acetic Acid-Peroxidase Conjugate(Theophylline-7-acetic Acid-HRP) |
表白桦脂酸-辣根过氧化物酶标记物 | Fluvastatin-Peroxidase Conjugate(Fluvastatin-HRP) |
乙酸茶碱-辣根过氧化物酶标记物 | Acemetacin-Peroxidase Conjugate(Acemetacin-HRP) |
辣根过氧化物酶修饰氟伐他汀 | Diacerein-Peroxidase Conjugate(Diacerein-HRP) |
辣根过氧化物酶标记阿西美辛 | Embonic Acid-Peroxidase Conjugate(Embonic Acid-HRP) |
以上资料来自西安齐岳生物科技有限公司zhn2020.11.10