DOPE/CHOL/OA(4:4:3)酸敏脂质体的制备

制备组成分别为DOPE/Chol/OA(4:4:3)的酸敏脂质体及DOPC/Chol/OA(4:4:3)脂质体,用于包裹质粒pSV_2-neo,pUC18-ras,pSV-neo-ras及大分子线状DNA,包裹率可达50%.被脂质体包裹的DNA不被DNase降解,提示DNA分子被脂质体包裹在微球体内部.

电泳检测表明,被包裹的DNA分子没有断裂.所得到的脂质体较稳定,4℃放置5～6月,脂质体内仍保留部分DNA分子.

制备酸敏脂质体时,pH为8.0时脂质体较稳定,pH<6.5～7时则不稳定.

脂质体的质量控制

1、形态、粒径及其分布

采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。

如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。

2、包封率和载药量

包封率:包封率=(脂质体中包封的**/脂质体中**总量)×*

一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离**和脂质体分离,分别测定,计算包封率。通常要求脂质体的**包封率达80%以上。

载药量:载药量=[脂质体中**量/(脂质体中**+载体总量)]×*

载药量的大小直接影响到**的剂量,故载药量愈大,愈易满足临床需要。载药量与**的性质有关,通常亲脂性**或亲水性**较易制成脂质体。

3、脂质体的稳定性

1)、物理稳定性:主要用渗漏率表示。

渗漏率=(放置前介质中**量-放置后介质中的药量)/制剂中药量x*

胆固醇可以加固脂质双分子层膜,降低膜流动,可减小渗漏率。

2)、化学稳定性:

(1)磷脂氧化指数:氧化指数=A233nm/A215nm;一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。

(2)磷脂量的测定:基于每个磷脂分子中仅含1个磷原子,采用化学法将样品中磷脂转变为无机磷后测定磷摩尔量(或重量),即可推出磷脂量。

4、防止氧化的措施:

防止氧化的一般措施有充入氮气,添加抗氧剂-生育酚、金属络合剂等;也可直接采用氢化饱和磷脂。

5、脂质体的*:

*的一般方法有过滤*、无菌操作、-射线照射(60钴15~20kGy)、121℃热压*等。

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