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蛋白酶 WSS1A/核酸内切酶MUS81和磷酸二酯酶TDP1的特异性蛋白酶能酶解部分交联的蛋白质
发布时间:2021-03-29     作者:wyf   分享到:

蛋白酶 WSS1A/核酸内切酶MUS81和磷酸二酯酶TDP1的特异性蛋白酶能酶解部分交联的蛋白质DNA-DPC

西安齐岳生物科技有限公司主营产品:小分子PEG︱小分子聚乙二醇︱单分散PEG︱短链小分子PEG︱单分散短链小分子PEG︱修饰性PEG聚乙二醇

蛋白酶 WSS1A,核酸内切酶MUS81和磷酸二酯酶 TDP1 参与植物DPC 研究。

Wss1(酵母金属蛋白酶)是参与DPC 的蛋白。缺失 Wss1 的细胞对甲醛尤其。

除了 Wss1/SPRTN 组成的特异性蛋白酶能酶解部分交联的蛋白质,其他酶活性蛋白也能特异 DNA-蛋白质加合物。如酪氨酰-DNA 磷酸二酯酶ITyrosyl-DNA phosphodiesterase I, TDPI)直接水解酪氨酰-DNA 磷酸二酯键。

除了蛋白酶的酶解作用和交联水解之外,DPC还可通过DNA核酸内切酶作用加工。

植物具有两种Wss1的直系同源基因(orthologue),WSS1A WSS1B,两者都在N末端有类泛素化(UBL)结构域,在系统树上皆属于UBL-Wss1分支 

 TDP 与同源重组所引发的DPC的作用。使用三种 tdp1 突变株系,tdp1-2SALK119060),T-DNA 插入在8号外显子中,除了 T-DNA 突变体系外,还使用了两个 CRISPR/Cas9 技术构建的突变株系 tdp1-3 tdp1-4。发现这三个突变体表型与野生型无异,对CPT的性也与野生型无异。

通过构建 wss1A mus81 tdp1 mus81 双突变体对比各自的单突变体和野生型,发现mus81-1 单突变体与野生型生长状况并无区别,而wss1A mus8-1 则表现出了比 wss1A 更强烈的突变表型。有趣的是,CPT 处理后, mus81 表现出了比 wss1A 更强烈的表型,双突变体则呈现了强烈的叠加效应。还检测了 tdp1-4 mus81-1 CPT处理的表型差异,

通过植株正常表型以及在 CPT 处理后表现出生长缺陷和根分生组织中死细胞增加的事实表明在拟南芥中存在三种独立的DPC途径,DNA 核酸内切酶 MUS81 和蛋白酶 WSS1A 为主要参与者,磷酸二酯酶 TDP1 作为备用。

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