定义与结构
FITC-E7是指异硫氰酸荧光素标记的多肽E7。多肽E7通常具有特定的氨基酸序列,而FITC则通过其异硫氰酸酯基团与多肽E7中的氨基发生化学反应,形成稳定的硫脲键连接,从而赋予多肽E7绿色荧光特性。
制备过程
准备多肽E7:确保多肽E7的纯度和浓度符合标记要求,通常需要进行适当的纯化和浓度调整。
溶解FITC:将FITC溶解在适当的溶剂中,如二甲基亚砜(DMSO)或乙醇,制备成高浓度的FITC溶液。此过程应在避光条件下进行,因为FITC对光敏感。
标记反应:在适当的pH条件下(通常为碱性条件,如pH 8.0-9.0),将多肽E7溶液与FITC溶液混合,并在室温或低温下孵育一段时间(如几小时至过夜),使FITC与多肽E7的氨基发生反应。
终止反应:通过加入适量的缓冲液或降低pH值来终止反应,防止FITC进一步与溶液中的其他成分反应。
纯化标记产物:使用适当的纯化方法(如透析、凝胶过滤、离心等)去除未反应的FITC和其他杂质,得到纯化的FITC-E7标记产物。
应用
FITC-E7在生物医学研究中具有广泛应用,特别是在细胞成像、组织工程以及药物筛选等方面。其绿色荧光特性使得研究人员能够方便地追踪和观察多肽E7在细胞和组织中的分布和动态变化。
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