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5-异硫氰酸荧光素FITC标记肌浆网(SR)囊泡 定制合成
发布时间:2024-10-21     作者:kx   分享到:

产品名称:5-异硫氰酸荧光素FITC标记肌浆网(SR)囊泡         定制合成

产品简介:

5-异硫氰酸荧光素(FITC)标记肌浆网(Sarcoplasmic Reticulum, SR)囊泡是一种常见的实验技术,广泛应用于细胞生物学和生物化学研究,特别是在研究肌肉细胞内钙离子储存与释放、肌浆网功能及其与其他细胞结构相互作用方面。

材料准备

  1. 肌浆网囊泡:可以从肌肉细胞中分离得到,通常使用组织匀浆和离心法进行分离。

  2. 5-异硫氰酸荧光素(FITC):选择高纯度的FITC,确保其适用于生物实验。

  3. 缓冲液:使用适合的缓冲液,如PBS(磷酸盐缓冲盐水)或HEPES缓冲液。

  4. 有机溶剂:如DMSO或无水乙醇,用于溶解FITC。

标记步骤

  1. 分离肌浆网囊泡

    • 从新鲜肌肉组织中制备匀浆(如兔子或小鼠的骨骼肌)。

    • 将匀浆通过离心(例如,10,000 g,10-20分钟)去除细胞核和其他细胞器,得到上清液。

    • 继续离心(如100,000 g,1小时)以沉淀肌浆网囊泡。

    • 通过重悬和进一步的洗涤去除杂质。

  2. FITC溶解

    • 将FITC溶解在适量的DMSO或无水乙醇中,制备浓度为5-10 mg/mL。

  3. 标记反应

    • 将FITC溶液缓慢加入到肌浆网囊泡的悬浮液中,轻轻混合,确保充分接触。

    • 为了优化标记反应,可以调整pH至8-9,以提高FITC与囊泡膜上氨基的结合。

  4. 反应条件

    • 在室温下反应1-3小时,具体时间视实验需求而定。

  5. 纯化

    • 反应结束后,通过透析或离心法去除未反应的FITC和其他小分子,确保得到纯化的FITC标记肌浆网囊泡。

    • 对于透析,使用合适的膜(如10 kDa分子量截留)去除未反应的FITC。

  6. 鉴定

    • 使用荧光光谱、SDS-PAGE或动态光散射(DLS)等方法确认FITC标记的成功以及肌浆网囊泡的特性。

5-异硫氰酸荧光素FITC标记肌浆网(SR)囊泡         定制合成

包装:瓶装

规格:mg/g

用途:科研!

保存时间:一年

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

关于我们:西安齐岳生物科技有限公司是一家从事科研试剂、多肽、磷脂、发光材料、超分子、光刻胶、碳纳米管、纳米材料、蛋白质交联剂、脂质体研发、定制合成的高科技生物公司。

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