名称:异硫氰酸荧光素FITC标记蓖麻豆凝集素;FITC-RCA
包装:mg级和g级
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
储存时间:1年
保存:冷藏
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验
FITC标记
a. 标记原理
异硫氰酸荧光素(FITC):一种广泛应用的荧光染料,具有强烈的荧光特性,适用于生物标记。FITC通过其异硫氰酸基团与氨基酸侧链(如赖氨酸、胱氨酸)反应,从而与蓖麻豆凝集素形成稳定的共价结合。
b. 合成步骤
材料准备:
蓖麻豆凝集素:可以通过从植物提取或通过基因重组技术获得。
FITC:作为试剂,通常以固体形式提供。
溶剂:如去离子水、PBS缓冲液或DMSO。
溶解和混合:
将蓖麻豆凝集素溶解在适当的缓冲液中,通常浓度在1-5 mg/mL。
将FITC溶解在DMSO中,浓度通常为1-5 mg/mL。
反应:
将FITC溶液缓慢加入蓖麻豆凝集素溶液中,轻轻混匀。反应时间通常为1-4小时,温度为室温或37°C。
为提高反应效率,可以在反应中加入适量的催化剂(如三乙胺)。
监测反应:
通过薄层色谱(TLC)或高效液相色谱(HPLC)监测反应进程,以确认FITC与蓖麻豆凝集素的结合程度。
去除未结合FITC:
通过透析、离心或柱层析去除未结合的FITC,以获得纯化的FITC-蓖麻豆凝集素复合物。
纯化和表征:
对最终产物进行纯化和表征,确认FITC的引入效果。可使用紫外-可见光谱(UV-Vis)、荧光光谱、质谱等技术进行分析。
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