HiBiT定点敲入，技术服务

齐岳生物生物提供基因敲入细胞株的构建服务，将人源化的 Cas 蛋白、双靶点 gRNA 和 Oligo DNA（donor DNA）同时转染至目的细胞，产生高效同源重组，实现基因的敲入。为了提高基因敲入效率，齐岳生物生物采用自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统，提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率，并降低随机插入风险。此外，齐岳生物生物还拥有丰富的项目经验，可根据客户的项目要求采用不同的方法体系，确保高成功率。

HiBiT 定点敲入是一种先进的基因工程技术，为生命科学研究提供了强大的工具。

HiBiT 是一种小的蛋白质标签，具有高灵敏度和易于检测的特点。通过将 HiBiT 标签定点敲入目标基因，可以实现对特定蛋白质的精确监测和分析。

首先，确定需要进行 HiBiT 敲入的目标基因。这通常是基于研究目的和对特定蛋白质功能的兴趣来选择的。例如，如果想研究某个蛋白质在细胞信号传导中的作用，或者追踪其在特定生理过程中的动态变化，就可以选择该蛋白质对应的基因作为敲入目标。

设计针对目标基因的敲入策略是关键步骤之一。需要选择合适的敲入位点，确保 HiBiT 标签的插入不会影响目标蛋白质的正常功能。同时，要考虑到敲入的效率和准确性，以提高实验的成功率。

构建含有 HiBiT 标签和同源重组序列的载体。这个载体通常包括目标基因的部分片段、HiBiT 标签序列、选择标记等。同源重组序列用于引导载体在目标基因组中的特定位置进行插入。

将构建好的载体导入目标细胞中。可以采用多种方法，如电穿孔、脂质体转染、病毒感染等。导入后，细胞的基因组修复机制会将 HiBiT 标签整合到目标基因中。

为了筛选出成功敲入 HiBiT 标签的细胞，通常会使用选择标记。例如，如果载体中含有抗性基因，那么只有成功整合了载体的细胞才能在含有相应抗生素的培养基中存活。

对筛选得到的细胞进行验证和分析。可以通过检测 HiBiT 标签的发光信号来确定其是否成功整合到目标蛋白质上。HiBiT 标签可以与特定的检测试剂结合，产生强烈的发光信号，从而实现对目标蛋白质的高灵敏度检测。

HiBiT 定点敲入技术具有许多优点。它具有极高的灵敏度，可以检测到极低水平的蛋白质表达。同时，HiBiT 标签的体积小，对目标蛋白质的功能影响较小。此外，该技术还可以与其他技术结合使用，如荧光成像、流式细胞术等，为多维度的研究提供支持。

在基础研究中，HiBiT 定点敲入可以帮助科学家深入了解蛋白质的功能、相互作用和调控机制。在药物研发领域，该技术可以用于药物靶点的鉴定和筛选，以及药物作用机制的研究。

然而，HiBiT 定点敲入技术也存在一些挑战。例如，敲入过程可能会出现脱靶效应，导致其他基因的意外插入。此外，标签的引入可能会引起免疫反应或其他不良影响，需要进行严格的安全性评估。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。