CRISPR/Cas9系统介导Slc6a6基因敲除大鼠，实验外包

Slc6a6 基因在神经系统的功能中起着重要作用，利用 CRISPR/Cas9 系统构建 Slc6a6 基因敲除大鼠对于深入研究该基因的功能以及相关神经疾病的机制具有重要意义。

首先，需要设计针对 Slc6a6 基因的 sgRNA（single - guide RNA）。通过对 Slc6a6 基因的序列进行分析，选择合适的靶点来设计 sgRNA，以确保其能够准确地引导 Cas9 蛋白对目标基因进行切割。这些靶点通常位于基因的编码区或调控区，并且要尽量避免对其他基因的非特异性切割，以减少脱靶效应。

接下来，将设计好的 sgRNA 与 Cas9 蛋白的表达载体构建在一起。这个载体将被用于导入大鼠的受精卵或胚胎干细胞中。在受精卵阶段，可以通过显微注射的方法将载体直接注入受精卵的细胞质或细胞核中。对于胚胎干细胞，则可以使用电穿孔、脂质体转染等方法将载体导入细胞内。

一旦载体进入细胞，Cas9 蛋白在 sgRNA 的引导下，会特异性地识别并结合到 Slc6a6 基因的目标位点，然后对 DNA 进行切割，造成双链断裂。细胞的 DNA 修复机制会对这种损伤进行修复，非同源末端连接（NHEJ）修复过程中可能会导致碱基的插入或缺失，从而破坏 Slc6a6 基因的正常结构和功能，实现基因敲除。

为了筛选出成功敲除 Slc6a6 基因的大鼠，需要进行一系列的鉴定和检测。可以通过 PCR 扩增 Slc6a6 基因所在的区域，并对扩增产物进行测序，以确定是否存在基因突变。此外，还可以利用实时定量 PCR（qRT - PCR）、Western blotting 等方法检测 Slc6a6 基因的 mRNA 和蛋白质表达水平，若其表达显著降低或完全缺失，则表明基因敲除成功。

构建好的 Slc6a6 基因敲除大鼠可以用于多种研究。例如，可以观察大鼠在神经系统发育、学习记忆、行为表现等方面的变化，以揭示 Slc6a6 基因在神经系统功能中的作用。还可以将基因敲除大鼠应用于神经疾病模型的研究，

齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

推荐服务：

HCT116细胞敲除NLRP6基因

L929细胞敲除RIPK1基因

SgRNA-Cas9载体构建

基于AsCas12a的CRISPRi功能基因组学平台

CRISPRi表观基因组编辑靶向 TNFR1

提前引入终止密码子实现无脱靶风险的基因敲除

利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰小鼠模型

利用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除大鼠及小鼠模型

应用CRISPR/Cas9技术敲除多个靶基因

利用CRISPR/Cas9技术构建敲除MEIS2基因的HEK293T人胚肾细胞系

利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2

基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建

基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除

全新DNA编辑工具——CRISPR-Cas9技术

使用CRISPR/Cas9技术和TALEN技术敲除斑马鱼特定基因片段

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。