CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型，基因敲除的定制服务

齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术，可用于修改生物体的DNA序列。CRISPR是一种天然存在于细菌和古细菌中的免疫系统，能够识别并剪切入侵的病毒基因组。通过引入Cas9蛋白和相应的引导RNA，CRISPR-Cas9技术可以准确地定位和剪切特定DNA序列。通过这种方式，可以实现基因敲除、基因修饰和基因插入等操作。这项技术相对简单、高效且灵活，已应用于生物医学研究和农业改良等领域，为科学家提供了有效的工具来研究基因功能，

CRISPR/Cas9 技术的出现为构建小鼠癌症模型提供了一种高效的方法。首先，需要确定与癌症发生相关的基因。这些基因可以是癌基因，它们的异常激活会促进细胞的恶性转化；也可以是抑癌基因，它们的失活会导致细胞失去正常的生长调控。通过对人类癌症样本的基因组分析以及对癌症生物学的深入研究，确定关键的癌症相关基因作为编辑目标。

设计针对目标基因的 sgRNA（single - guide RNA）。sgRNA 能够引导 Cas9 蛋白特异性地识别并结合到目标基因组序列上。在设计 sgRNA 时，需要考虑其特异性和编辑效率，以确保能够准确地对目标基因进行编辑。

接下来，将 sgRNA 和 Cas9 蛋白导入小鼠的受精卵或胚胎干细胞中。可以通过显微注射、电穿孔等方法将基因编辑工具递送到细胞内。Cas9 蛋白在 sgRNA 的引导下，对目标基因进行切割，导致 DNA 双链断裂。

细胞会通过自身的修复机制对断裂的 DNA 进行修复。非同源末端连接（NHEJ）修复机制通常会导致基因的插入或缺失，从而破坏基因的功能；同源重组（HR）修复机制则可以在提供同源模板的情况下，实现对基因的精确修饰。通过利用这些修复机制，可以在小鼠基因组中引入与人类癌症相似的基因突变。

将经过基因编辑的受精卵或胚胎干细胞移植到代孕母鼠体内，使其发育成完整的小鼠个体。随着小鼠的生长发育，由于基因的改变，可能会逐渐出现癌症的症状和体征。

构建成功的小鼠癌症模型可以模拟人类癌症的多种特征，如肿瘤的发生、发展、转移以及对治疗的反应等。通过对这些模型的研究，可以深入了解癌症的分子机制，筛选有效的抗癌药物，并评估新的治疗策略的效果。

例如，可以利用 CRISPR/Cas9 技术构建肺癌模型，通过敲除或突变与肺癌发生相关的抑癌基因，如 p53、Lkb1 等，观察小鼠肺部肿瘤的形成和发展过程。还可以同时编辑多个基因，以更真实地模拟人类癌症的复杂性。

此外，CRISPR/Cas9 技术还可以用于构建条件性癌症模型，即在特定的组织或细胞类型中，通过诱导表达 Cas9 蛋白或 Cre 重组酶，实现对目标基因的特异性敲除或修饰，从而更好地研究癌症在特定环境下的发生发展机制。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。