CRISPR/Cas9条件性基因敲除鼠,定制服务
传统的基因敲除方法往往会导致基因在全身所有细胞中完全缺失,这可能会引起胚胎致死或其他严重的表型,从而限制了对基因在特定组织或细胞类型中功能的研究。而 CRISPR/Cas9 条件性基因敲除技术则可以克服这些问题。
在构建 CRISPR/Cas9 条件性基因敲除鼠时,首先需要设计合适的 sgRNA(single - guide RNA)。这些 sgRNA 要针对目标基因的特定区域,并且要考虑到后续的条件性敲除策略。通常会选择在基因的关键外显子或调控区域设计 sgRNA。
然后,将 sgRNA 和 Cas9 蛋白的表达载体通过显微注射等方法导入小鼠的受精卵中。Cas9 蛋白在 sgRNA 的引导下,会对目标基因进行切割,导致 DNA 双链断裂。细胞自身的修复机制可能会导致基因的突变或缺失。
为了实现条件性敲除,还需要在目标基因的两侧引入特定的重组位点,如 loxP 位点。当小鼠表达 Cre 重组酶时,Cre 酶会识别 loxP 位点并介导基因的重组,从而实现基因在特定组织或细胞类型中的敲除。
通过这种方式,可以在不同的发育阶段或不同的组织中特异性地敲除目标基因,从而更精确地研究基因在特定条件下的功能。例如,可以通过在特定组织中表达 Cre 酶,来研究目标基因在该组织中的作用;或者通过使用诱导型 Cre 系统,在特定的时间点激活基因敲除,观察基因在不同发育阶段的功能。
CRISPR/Cas9 条件性基因敲除鼠的构建为深入研究基因功能提供了强大的手段。它可以帮助我们更好地理解基因在生理和病理过程中的作用,为疾病的研究和治疗提供更准确的模型。
此外,与传统的基因敲除技术相比,CRISPR/Cas9 条件性基因敲除技术具有更高的效率和准确性,并且可以更灵活地设计敲除策略。然而,该技术也存在一些挑战,如脱靶效应、Cre 酶的特异性表达等问题,需要在实验中进行严格的控制和检测。
齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
细胞基因敲除服务
Cas9-Cell Line Gene Knock-Out service(CGKO)基因敲除细胞系服务是针对各种常用的细胞系,进行基因片段敲除的技术服务。主要提供:Cas9介导的大片段基因敲除(非移码)的方式导致细胞基因功能缺失,基因敲除可以将基因功能完全消除,比RNA干扰获得的数据更加确定,没有RNA干扰残留的基因功能背景的干扰,目前越来越成为主流的基因功能研究方式。
ESC或iPSC干细胞基因敲入
荧光/蛋白标签定点敲入
CRISPR/CAS9介导基因敲入
基因敲入单克细胞一株
Tag标签敲入(无痕敲入)
报告基因敲入
基于puro标记筛选的safe harbor位点基因敲入(标记筛选)
基因敲入小鼠
条件性基因编辑小鼠
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。