SgRNA-Cas9载体构建，基因敲除定制服务

SgRNA - Cas9 载体的构建是 CRISPR/Cas9 基因编辑技术的关键步骤之一。

首先，需要设计合适的 sgRNA。sgRNA 是由一个特定的支架序列和一个与目标基因互补的 20 个核苷酸左右的序列组成。通过在线工具或软件，可以根据目标基因的序列设计出有效的 sgRNA。设计时需要考虑多个因素，如 sgRNA 的特异性、效率以及避免脱靶效应等。

接下来，合成 sgRNA 序列。可以通过化学合成的方法获得 sgRNA 序列，然后将其克隆到合适的载体中。常用的载体包括质粒载体等。在载体中，sgRNA 序列通常位于特定的启动子下游，以确保其能够在细胞内正确转录。

同时，还需要将 Cas9 基因也克隆到载体中。Cas9 基因可以从不同的来源获取，如细菌等。将 Cas9 基因与 sgRNA 序列构建在同一载体中，使得它们能够同时被导入细胞中。

在构建载体的过程中，还需要添加一些调控元件，如启动子、终止子等，以保证 sgRNA 和 Cas9 基因的正确表达和转录。此外，为了便于筛选和鉴定成功转染的细胞，还可以在载体中加入抗性基因或荧光蛋白基因等标记基因。

构建好的 SgRNA - Cas9 载体需要进行质量检测和验证。可以通过酶切鉴定、测序等方法确保载体的正确性和完整性。同时，还可以通过体外转录和蛋白质表达实验，验证 sgRNA 和 Cas9 蛋白的表达情况。

齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求，结合靶基因的情况，设计不同的基因敲除方案。例如，移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。

CRISPR/Cas9基因敲除

基因敲入细胞

"基因敲入是指将外源性基因通过同源末端重组的方式插入到基因组中，使其在细胞内稳定表达的一种基因编辑技术。相比于基因敲除（KO），在设计 KI 的实验方案时需考虑的影响因素更多，如敲入基因片段的长短、同源重组效率等。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。