基因敲除(Knock out)和基因敲入(Knock in)，基因敲除定制服务

基因敲除（Knock out）和基因敲入（Knock in）是现代分子生物学中重要的基因编辑技术，它们为研究基因功能和疾病机制提供了有力手段。

基因敲除是指通过特定的技术手段使细胞或生物体中的某个基因失去功能。常见的方法如 CRISPR/Cas9 技术，通过设计针对目标基因的向导 RNA（sgRNA），引导核酸酶对基因进行切割，然后细胞通过非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复（HDR）机制对 DNA 损伤进行修复。NHEJ 修复通常会引入插入或缺失突变，导致基因的阅读框改变，从而使基因无法正常表达蛋白质，实现基因敲除。基因敲除可以帮助研究人员确定基因在细胞生长、分化、代谢以及对环境刺激的反应等方面的作用。

基因敲入则是将外源基因或基因片段整合到细胞或生物体的基因组中。同样可以利用 CRISPR/Cas9 技术，在目标位置造成 DNA 双链断裂，然后提供含有同源臂的外源基因片段，细胞通过 HDR 机制将外源基因准确地整合到基因组中。基因敲入可用于引入报告基因以追踪基因表达或细胞活动，也可以用于修复致病基因的突变，为基因提供了新的思路。

齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统，显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率，并降低随机插入风险。

基于CRISPR-Cas9的基因敲入（KI）

原理：当Cas9内切酶切割双链DNA时，同时提供一段与靶基因高度同源的DNA修复模板，生物体即可启动HDR修复路径。这段模板可以是单链DNA（ssDNA），也可以是双链DNA（dsDNA)，上面包含一段目的序列，其两侧序列与切口附近的基因组序列一致，因此可以作为同源臂将一段DNA序列精准地插入特定的基因组位点，从而实现精确的基因敲入。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。