CRISPR/Cas9技术应用之基因敲除，基因敲除的实验研究

CRISPR/Cas9 技术作为一种强大的基因编辑工具，在基因敲除方面有着广泛而深入的应用。CRISPR/Cas9 系统主要由 Cas9 蛋白和向导 RNA（sgRNA）组成。sgRNA 能够引导 Cas9 蛋白特异性地识别并结合到基因组的特定位置。当 Cas9 蛋白与目标 DNA 序列结合后，它会切割 DNA 双链，造成 DNA 断裂。细胞自身的修复机制会对这种断裂进行修复，其中非同源末端连接（NHEJ）修复方式往往会导致基因序列发生插入或缺失突变，从而破坏基因的阅读框，使基因失去功能，实现基因敲除。

该技术在生命科学研究的多个领域都发挥着重要作用。在基础研究中，通过敲除特定基因，可以深入了解该基因在细胞生理、发育、代谢等过程中的功能。例如，在神经生物学中，敲除与神经退行性疾病相关的基因。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

基因敲入是指将一个新的基因或DNA序列插入到基因组中的一个特定位置。可以通过同源重组、病毒载体或CRISPR/Cas9来实现。同源重组介导的基因敲入需要将一个包含所需基因序列的修饰DNA片段引入到目标位点；病毒载体，如逆转录病毒或腺相关病毒（AAVs），可以用来将新基因传递到基因组中；CRISPR/Cas9也可以通过使用供体DNA模板以及sgRNA和Cas9酶来插入一个基因。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。