基因敲进 定制服务
基因敲进定制服务是一项先进的基因编辑技术服务,为科研人员提供了在细胞或生物体基因组中精确插入外源基因或基因片段的解决方案。
我们的基因敲进定制服务团队由经验丰富的专业人员组成。在接到客户需求后,我们首先会与客户深入探讨研究目标和期望插入的基因或基因片段。然后,利用先进的基因编辑工具,如 CRISPR/Cas9 系统,设计针对性的敲进方案。
在实施过程中,我们通过精确设计 sgRNA,引导 Cas9 蛋白在基因组的特定位置产生双链断裂。同时,我们提供含有同源臂的外源基因或基因片段供体模板。细胞通过同源定向修复(HDR)机制,将外源基因或基因片段准确地整合到基因组的目标位置。
为确保基因敲进的准确性和效率,我们采用严格的筛选和鉴定方法。运用分子生物学技术,如 PCR、测序和基因表达分析等,对敲进后的细胞或生物体进行全面检测,以验证外源基因或基因片段的正确插入和表达。
在整个服务过程中,我们注重与客户的沟通和合作,及时向客户汇报实验进展,并根据客户的反馈和需求进行优化和调整。基因敲进定制服务广泛应用于基因功能研究、疾病模型构建和基因治疗等领域,为科研人员提供了强大的技术支持,帮助他们深入探索生命科学的奥秘,为开发新的治疗方法和生物制品奠定基础。
齐岳生物生物自主开发的 CRISPR 细胞基因编辑系统,显著提高基因敲入细胞株构建过程中的高同源重组效率,并降低随机插入风险。
基因敲减
基因敲减(knock-down,KD)通常也称基因沉默(Silence),是指通过降解具有同源序列靶基因的mRNA,达到阻止基因表达的作用,常用技术有siRNA,shRNA等。
二、shRNA基因敲减原理
shRNA(short hairpin RNA),即短发夹RNA,包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔组成发夹结构,该元件由RNA聚合酶Ⅲ(PolⅢ)启动子控制。随后再连上5~6个“T”作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。该发夹序列在细胞内形成一个“双链RNA”(dsRNA),被胞内核酸内切酶(Dicer)识别并切割成小片段,这些片段在mRNA解旋酶的作用下解链。其中反义链与内切酶、外切酶、解旋酶等结合形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-InducedSilencingComplex,RISC),RISC与靶基因mRNA的同源区特异性结合,对靶基因mRNA进行切割,从而阻断目的基因表达。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。