条件性基因敲除 定制服务
我们的条件性基因敲除定制服务基于**的基因编辑技术,如 Cre - LoxP 系统与 CRISPR/Cas9 技术的结合。在项目开始前,我们的专业团队会与客户充分沟通,详细了解研究目的和需求,确定目标基因以及期望的敲除条件,例如特定的组织、细胞类型或发育阶段。
接下来,我们会精心设计实验方案。通过基因编辑技术在目标基因的关键位点插入 LoxP 序列。然后,根据客户需求,引入 Cre 重组酶,使其在特定条件下表达。当 Cre 重组酶存在时,它会识别并结合 LoxP 位点,介导两个 LoxP 位点之间的 DNA 序列发生重组,从而实现条件性基因敲除。
在整个过程中,我们严格把控实验质量,运用多种分子生物学技术对基因敲除效果进行精准检测和验证。同时,我们为客户提供全方位的技术支持和咨询服务,及时解答客户的疑问,根据实验进展和客户反馈进行优化和调整。
条件性基因敲除定制服务在研究基因在特定生理或病理过程中的功能方面具有独特优势。它可以避免全基因敲除可能导致的胚胎致死等问题,使研究人员能够更准确地揭示基因在特定组织或细胞中的作用,为疾病机制研究提供重要的实验基础。
齐岳基因优化升级了转染载体系统,结合多年细胞生物学经验,建立了一套成熟稳定的基因过表达实验体系,可针对多种不同细胞(包括难转染细胞、悬浮细胞),提供优质的稳定细胞系构建服务。帮助广大科研客户实现特定基因在细胞系中持续、稳定的表达,为研究和应用提供稳定的实验基础。
细胞类型:细胞系、干细胞等可转染、无限传代的细胞,齐岳生物基因具有300+种细胞培养经验,
一、基因敲减
基因敲减(knock-down,KD)通常也称基因沉默(Silence),是指通过降解具有同源序列靶基因的mRNA,达到阻止基因表达的作用,常用技术有siRNA,shRNA等。
二、shRNA基因敲减原理
shRNA(short hairpin RNA),即短发夹RNA,包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔组成发夹结构,该元件由RNA聚合酶Ⅲ(PolⅢ)启动子控制。随后再连上5~6个“T”作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。该发夹序列在细胞内形成一个“双链RNA”(dsRNA),被胞内核酸内切酶(Dicer)识别并切割成小片段,这些片段在mRNA解旋酶的作用下解链。其中反义链与内切酶、外切酶、解旋酶等结合形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-InducedSilencingComplex,RISC),RISC与靶基因mRNA的同源区特异性结合,对靶基因mRNA进行切割,从而阻断目的基因表达。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。