双gRNA载体应用于大片段基因敲除,基因敲除定制服务
在基因编辑领域,双 gRNA(guide RNA)载体在大片段基因敲除方面展现出独特的优势。
双 gRNA 载体的工作原理是通过设计两个特异性的 gRNA,分别靶向目标基因的不同位置。当这两个 gRNA 与 Cas 蛋白(如 Cas9)结合并引导其在基因组上的相应位置进行切割时,会在目标基因上产生两个双链断裂。细胞的 DNA 修复机制在处理这些断裂时,可能会导致两个切割位点之间的大片段基因缺失。
与传统的单 gRNA 介导的基因敲除相比,双 gRNA 载体更适合用于大片段基因敲除。例如,对于一些结构复杂或功能由多个区域共同决定的基因,通过敲除大片段基因可以更全面地研究其功能。此外,在构建疾病模型时,大片段基因敲除可能更接近某些疾病中基因的真实变异情况。
在实际应用中,双 gRNA 载体的设计需要精确考虑多个因素。gRNA 的选择要确保其特异性和切割效率,以避免脱靶效应和非特异性切割。同时,还需要优化载体的构建和转染条件,以提高基因编辑的成功率。通过对敲除后的细胞进行筛选和鉴定,可以获得稳定的大片段基因敲除细胞系。
双 gRNA 载体应用于大片段基因敲除为基因功能研究和疾病模型构建提供了一种强大的工具。它有助于深入理解基因的结构与功能关系,为开发新的治疗策略和药物靶点提供重要的理论基础。
齐岳生物提供专业基因敲除细胞定制服务。我们可以根据您的需求,结合靶基因的情况,设计不同的基因敲除方案。例如,移码敲除、片段敲除、多基因敲除等。
基因敲除是指使生物体基因组中的特定基因失活或失效的过程。通常是通过在靶基因中引入突变来实现的,使其失去功能。进行基因敲除的方法,包括同源重组、RNA干扰(RNAi)和CRISPR/Cas9。同源重组即通过引入修饰的DNA片段,用无功能或被破坏的版本替换靶基因;RNAi利用小RNA分子来沉默或降解靶基因的信使RNA(mRNA),阻止其翻译为蛋白质;CRISPR/Cas9是一种基因编辑工具,它使用引导RNA(sgRNA)和Cas9酶在基因组的特定位置引入靶向DNA断裂,导致基因破坏。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。