ESC或iPSC干细胞敲除，实验外包

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

ESC 和 iPSC 干细胞敲除的方法

CRISPR/Cas9 技术

这是目前的基因敲除方法之一。通过设计针对目标基因的 sgRNA，引导 Cas9 核酸酶对目标基因进行切割，产生双链断裂。干细胞通过非同源末端连接或同源定向修复机制修复双链断裂，从而实现基因敲除。

CRISPR/Cas9 技术具有高效、简便、特异性强等优点，适用于大规模的基因敲除筛选和复杂的基因编辑操作。

同源重组技术

利用干细胞内的同源重组机制，将含有特定突变（如缺失目标基因部分序列）的 DNA 片段导入干细胞，与干细胞内的基因组发生同源重组，从而实现基因敲除。

同源重组技术的敲除效率相对较低，但可以实现精确的基因编辑，适用于对特定基因进行定点敲除。

TALEN 和 ZFN 技术

TALEN（转录激活因子样效应物核酸酶）和 ZFN（锌指核酸酶）技术也是常用的基因编辑方法。它们通过设计特定的核酸酶，识别并切割目标基因，实现基因敲除。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。