多基因敲除（双敲/多敲），定制服务

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

多基因敲除，包括双敲（两个基因同时敲除）和多敲（多个基因同时敲除），是一种强大的研究工具，在生命科学研究中具有重要意义。

一、多基因敲除的重要性

研究基因之间的相互作用

单个基因的功能往往受到其他基因的影响，通过多基因敲除可以直接观察多个基因同时缺失时对细胞或生物体的影响，从而揭示基因之间的相互作用关系。

例如，在研究信号通路时，多个基因可能共同参与调节一个特定的生物学过程，多基因敲除可以帮助确定这些基因在通路中的具体作用和相互关系。

功能冗余基因的研究

有些基因在功能上可能存在冗余，即一个生物学过程可以由多个基因共同完成。单基因敲除可能不会产生明显的表型变化，而多基因敲除可以揭示这些功能冗余基因的作用。

例如，在某些代谢途径中，多个酶可能具有相似的功能，多基因敲除可以确定这些酶在代谢中的具体贡献。

二、多基因敲除的方法

逐步敲除法

先敲除一个基因，然后在已敲除基因的细胞或生物体基础上，再敲除另一个基因。这种方法可以逐步分析每个基因的单独作用和多个基因共同作用的效果。

缺点是操作相对繁琐，耗时较长，而且在多次基因敲除过程中可能会积累一些非特异性的突变或表型变化。

同时敲除法

使用基因编辑技术，如 CRISPR/Cas9 系统，同时设计多个针对不同基因的 sgRNA，引导 Cas9 核酸酶对多个基因进行切割，实现多个基因的同时敲除。

优点是操作相对简单、高效，可以快速获得多基因敲除的细胞或生物体。但需要注意的是，同时敲除多个基因可能会导致细胞或生物体的生存能力严重受损，影响后续的研究。

组合敲除法

结合逐步敲除法和同时敲除法的优点，可以先同时敲除一些关键基因，然后再逐步敲除其他相关基因，以更全面地研究基因之间的相互作用。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。