单基因移码/片段敲除基因敲除，定制服务

移码敲除和片段敲除是两种常见的基因敲除方式，它们在基因功能研究和模型构建等方面发挥着重要作用。

片段敲除

原理

片段敲除是通过删除基因的一部分或整个编码区，使基因完全或部分失去功能。

这种敲除方式可以更彻底地破坏基因的功能，对于研究基因的重要结构域或调控区域非常有用。

方法

同样可以使用基因编辑技术如 CRISPR/Cas9 系统来实现片段敲除。设计多个 sgRNA，分别针对基因的不同区域进行切割，然后通过细胞内的修复机制删除目标片段。

也可以利用同源重组技术，将含有缺失片段的供体 DNA 导入细胞，通过同源重组替换目标基因的相应区域。

应用

片段敲除在基因功能研究中可以用于确定基因的关键结构域或调控元件。通过删除不同的片段，观察对基因功能的影响，从而确定哪些区域对基因的正常功能至关重要。

在药物研发中，片段敲除可以帮助研究人员确定药物的作用靶点。通过敲除与药物作用相关的基因片段，可以评估药物的特异性和有效性。

移码敲除

原理

移码敲除是通过在基因的编码区引入插入或缺失突变，导致基因的阅读框发生移位，从而使翻译出的蛋白质失去功能。

这种突变通常会导致提前终止密码子的出现，使蛋白质合成提前终止，产生截短的、无功能的蛋白质。

方法

可以使用基因编辑技术如 CRISPR/Cas9 系统来实现移码敲除。设计针对目标基因的 sgRNA，引导 Cas9 核酸酶在基因的特定位置进行切割，然后通过非同源末端连接（NHEJ）修复机制引入随机的插入或缺失突变。

也可以通过化学诱变或辐射诱变等方法来产生随机的基因突变，然后筛选出具有移码突变的细胞或个体。

应用

移码敲除常用于研究基因的功能。通过破坏基因的正常编码序列，观察细胞或生物体在基因功能缺失后的表型变化，从而推断该基因的功能。

两种敲除方式的比较

敲除效果

移码敲除通常会产生截短的蛋白质，可能保留部分功能或产生新的功能。而片段敲除可以更彻底地破坏基因的功能，但也可能影响到其他基因的表达或调控。

技术难度

移码敲除相对较容易实现，只需要在基因的编码区引入少量的插入或缺失突变即可。而片段敲除需要设计多个 sgRNA 或进行同源重组，技术难度较大。

应用范围

移码敲除适用于研究基因的基本功能和疾病模型构建。片段敲除则更适合于深入研究基因的结构和功能关系，以及药物研发等领域。

总之，移码敲除和片段敲除是两种重要的基因敲除方式，它们各有优缺点，在不同的研究领域中都有广泛的应用。选择合适的敲除方式需要根据研究目的、基因特点和技术可行性等因素进行综合考虑。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。