稳定敲除细胞系定制服务，基因敲除的定制服务

在生物医学研究中，对基因功能的理解至关重要。基因敲除细胞是一种常用的方法，在细胞中敲除特定的基因，以此探究该基因在细胞中的作用。齐岳生物生物提供的基因敲除细胞定制服务，移码敲除、片段敲除、多基因敲除均可实现，快至6周，即可获得基因敲除纯合子单克隆。

稳定敲除细胞系是指通过特定技术手段使细胞中的特定基因被永久性敲除，并且这种敲除状态能够在细胞的多次传代过程中稳定维持的细胞类型。

一、稳定敲除细胞系的构建方法

选择合适的基因敲除技术

常用的技术包括 CRISPR/Cas9 技术、同源重组技术等。CRISPR/Cas9 技术具有操作简单、高效等优点，是目前构建稳定敲除细胞系的主要方法之一。

根据目标基因的特点和研究需求，选择最适合的基因敲除技术。

设计和构建敲除载体

对于 CRISPR/Cas9 技术，需要设计合成针对目标基因的 sgRNA，并将其克隆到合适的载体中。同时，可以在载体中加入选择标记基因，如抗生素抗性基因，以便于筛选稳定敲除的细胞。

对于同源重组技术，需要构建含有与目标基因同源序列以及选择标记基因的载体。

细胞转染

将构建好的敲除载体导入细胞中。常用的转染方法有脂质体转染、电穿孔转染、病毒载体转染等。选择合适的转染方法，确保转染效率和细胞存活率。

筛选稳定敲除细胞

如果转染载体中含有选择标记基因，可以使用相应的药物对转染后的细胞进行筛选，以获得稳定表达选择标记基因的细胞。

通过分子生物学方法，如 PCR、Western blot、测序等，对筛选出的细胞进行鉴定，确认目标基因是否被成功敲除。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。