基因敲除细胞 基因编辑细胞定制服务
齐岳基因创新研发了高效的基因敲入技术,此基因定点敲入定制服务采用了升级的CRISPR/Cas9系统,积攒十几年的基因编辑经验,总结出来gRNA和同源臂设计策略。齐岳基因提供的基因定点敲入服务具有更高的阳性率和更广的基因位点适用性!
CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术,可用于修改生物体的DNA序列。CRISPR是一种天然存在于细菌和古细菌中的免疫系统,能够识别并剪切入侵的病毒基因组。通过引入Cas9蛋白和相应的引导RNA,CRISPR-Cas9技术可以准确地定位和剪切特定DNA序列。通过这种方式,可以实现基因敲除、基因修饰和基因插入等操作。这项技术相对简单、高效且灵活,已应用于生物医学研究和农业改良等领域,为科学家提供了有效的工具来研究基因功能,
基因敲除的主要技术方法
同源重组技术
原理:利用细胞内的同源重组机制,将带有特定突变(如缺失目标基因部分序列)的 DNA 片段导入细胞,与细胞内的基因组发生同源重组,从而实现基因敲除。
步骤:
构建含有与目标基因同源序列以及选择标记基因(如抗生素抗性基因)的载体。
将载体导入细胞,通过同源重组使目标基因被敲除。
使用选择标记基因筛选出成功敲除基因的细胞。
CRISPR/Cas9 技术
原理:通过设计与目标基因序列互补的 sgRNA(single guide RNA),引导 Cas9 核酸酶对目标基因进行切割,产生双链断裂。细胞通过非同源末端连接(NHEJ)或同源定向修复(HDR)机制修复双链断裂,从而实现基因敲除或引入特定突变。
步骤:
设计合成针对目标基因的 sgRNA。
将 sgRNA 和 Cas9 蛋白导入细胞。
筛选出基因敲除的细胞。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。