CY7标记半乳糖（Galactose）是一种用于研究半乳糖在生物系统中行为的荧光探针方法。通过这种标记，可以跟踪半乳糖在细胞中的分布、与糖类受体的相互作用，以及其在代谢过程中的变化。

标记步骤

1. 半乳糖的衍生化：

• 由于半乳糖本身缺乏氨基，首先需要进行氨基化衍生化。例如，可以通过在半乳糖的还原末端引入氨基，使其具备与CY7-NHS酯反应的活性。

• 这可以通过将半乳糖与氨基乙酸（甘氨酸）反应来实现，从而引入一个自由的氨基。

2. CY7的溶解：

• 将CY7-NHS酯溶解在DMSO或DMF中，浓度约为1-5 mg/mL，以保持NHS酯的活性。

• 将氨基化的半乳糖溶解在pH 8.0-9.0的缓冲液中，浓度通常为1-10 mg/mL。

3. 偶联反应：

• 将CY7-NHS酯溶液逐滴加入到半乳糖溶液中，通常使用等摩尔比（1:1）或稍过量的CY7-NHS酯，以确保完全反应。

• 反应在室温下进行1-2小时，保持避光条件，以保护CY7的荧光不被光照破坏。

4. 终止反应：

• 反应结束后，可以加入过量的氨基化合物（如甘氨酸）以终止未反应的CY7-NHS酯。

5. 纯化：

• 使用透析、凝胶过滤柱或HPLC（高效液相色谱）纯化标记后的CY7-半乳糖，以去除未反应的CY7染料和其他杂质。

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