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Cy7.5标记低分子量黄原胶;Cy7.5-lower relative molecular weight xanthan gum;Cyanine7.5-LRWXG
发布时间:2024-09-26     作者:zyl   分享到:

Cy7.5是一种近红外荧光染料,具有发射波长较长(约780 nm),光穿透性强,光稳定性好,适用于活体成像、药物递送和分子探针的研究。

实验步骤

材料

  1. 低分子量黄原胶:分子量经过控制在适当范围内(一般为几千到几万道尔顿)。

  2. Cy7.5染料:选择合适的Cy7.5衍生物,如Cy7.5-NHS酯或Cy7.5-叠氮化物,根据黄原胶上的功能基团进行修饰。

  3. 反应缓冲液:通常选择pH 7.4的PBS缓冲液,确保黄原胶和Cy7.5染料的稳定性。

  4. 有机溶剂:如DMSO或DMF,用于Cy7.5染料的溶解。

  5. 纯化工具:透析膜或凝胶过滤柱,用于去除未反应的Cy7.5染料。

实验流程

  1. Cy7.5染料溶解:

    • 将Cy7.5-NHS酯或Cy7.5叠氮化物溶解在DMSO中,浓度为1-5 mM,确保染料在溶液中完全溶解。

  2. 黄原胶溶解:

    • 将低分子量黄原胶溶解在pH 7.4的PBS缓冲液中,浓度为1-5 mg/mL,根据实验需求调整浓度。

  3. 标记反应:

    • 将Cy7.5溶液慢慢加入到黄原胶溶液中,确保反应在温和条件下进行(通常在室温或4°C下反应2-4小时)。

    • Cy7.5-NHS酯可以与黄原胶中的羟基或氨基反应,形成共价键,而Cy7.5叠氮化物则可以通过点击化学(如CuAAC反应)与黄原胶上引入的炔基反应。

  4. 纯化标记产物:

    • 通过透析(透析膜分子量截留为1-3 kDa)或凝胶过滤法去除未反应的Cy7.5染料,确保标记后的黄原胶纯度。

    • 收集透析后的Cy7.5标记黄原胶溶液,冷冻干燥或直接用于后续实验。

  5. 表征标记产物:

    • 通过荧光光谱分析标记的成功,激发波长为750 nm,发射波长约为780 nm。

    • 使用UV-Vis光谱或荧光显微镜进一步确认标记的荧光特性。

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