中文名称：花菁染料Cy7.5标记纤溶药物尿激酶

英文名称：Cy7.5-urokinase；Cyanine7.5-uPA

纯度：98%

包装：mg级和g级

用途：科研

状态：固体/粉末/溶液

产地：西安

储存时间：1年

保存：冷藏

厂家：西安齐岳生物科技有限公司

温馨提醒：仅供科研，不能用于人体实验

近红外荧光素Cy7.5标记肌动蛋白多聚体F-actin 是一种用于研究肌动蛋白纤维（F-actin）的技术。通过将Cy7.5这种近红外荧光染料标记在F-actin上，可以在活体或体外实验中观察肌动蛋白的动态变化和分布。

实验流程

1. F-actin多聚体制备：

• 将G-actin溶解在G-肌动蛋白缓冲液（含ATP和Ca²⁺）中，并通过加入K⁺或Mg²⁺诱导肌动蛋白单体聚合为F-actin。通常在室温下孵育30分钟到1小时。

2. Cy7.5染料的准备：

• 将Cy7.5-NHS酯溶解在DMSO或DMF中，浓度为1-5 mM，并确保充分溶解。Cy7.5具有较强的亲脂性，需要小心操作以防止自发聚集。

3. 标记反应：

• 将Cy7.5染料缓慢加入到F-actin溶液中。该反应通常在0°C至4°C的低温环境中进行，以防止肌动蛋白纤维解聚。反应时间为2-4小时，确保充分反应。

• 标记反应的pH应保持在7.0-8.0之间，以确保Cy7.5染料与F-actin中的赖氨酸残基或其他可反应基团的共价结合。

4. 纯化标记的F-actin：

• 通过超速离心（约100,000 g，1小时）分离未反应的Cy7.5染料和F-actin纤维。收集沉淀部分，重悬于含ATP的F-actin缓冲液中，确保肌动蛋白纤维的稳定性。

5. 表征标记的F-actin：

• 通过荧光光谱验证Cy7.5标记的成功。Cy7.5的激发波长约为750 nm，发射波长约为780 nm。可以通过荧光显微镜或共聚焦显微镜观察标记后的F-actin在细胞中的分布。

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