使用 近红外Cy7.5 染料标记 松果菊苷的实验涉及化学反应将Cy7.5与松果菊苷中的活性基团（如羟基或羧基）进行共价连接。通常，Cy7.5染料通过活性基团（如NHS酯或马来酰亚胺）进行标记反应。

反应步骤

1. 松果菊苷溶解：

• 将松果菊苷溶解在适当的缓冲液中，通常是碳酸氢钠缓冲液（pH 8.3）或PBS缓冲液（pH 7.4），浓度为10-20 mM，确保完全溶解。

2. Cy7.5染料溶解：

• 使用少量DMSO或DMF溶解Cy7.5-NHS酯或Cy7.5-马来酰亚胺染料，浓度为1-5 mM。由于Cy7.5染料不溶于水，因此需要有机溶剂。

3. 反应进行：

• 将Cy7.5溶液逐渐加入到松果菊苷溶液中，保持摩尔比约为1:2至1:5，以确保松果菊苷的羟基或羧基与Cy7.5的活性基团反应。反应可以在室温或轻微加热（约37°C）下进行，时间为2-4小时，轻轻震荡混合。

4. 纯化：

• 反应结束后，使用超滤管或透析袋进行纯化。透析可以去除未反应的Cy7.5染料，透析液可以是去离子水或PBS缓冲液。透析时间一般为12-24小时，多次更换透析液。

5. 产物表征：

• 通过紫外-可见光谱和荧光光谱表征标记产物。Cy7.5染料在750 nm左右有吸收峰，发射波长在780 nm附近。通过HPLC或质谱（如MALDI-TOF或ESI-MS）进一步确认是否成功标记松果菊苷。

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