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绿色荧光素FITC标记肌动蛋白多聚体F-actin
发布时间:2024-09-20     作者:zyl   分享到:

名称:绿色荧光素FITC标记肌动蛋白多聚体F-actin

包装:mg级和g级

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

储存时间:1年

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验

绿色荧光素FITC标记肌动蛋白多聚体F-actin

绿色荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记肌动蛋白多聚体(F-actin)是一种常用的方法,用于细胞骨架研究和荧光成像。以下是标记的基本步骤:

合成步骤概述:

  1. 材料准备:

    • 肌动蛋白:通常使用从肌肉或细胞提取的肌动蛋白,或从商业供应商处购买纯化的肌动蛋白。

    • FITC溶液:将FITC溶解在无水DMF或DMSO中,浓度为1-5 mg/mL。

  2. 反应条件:

    • 调整反应体系的pH值,通常在碱性条件(pH 8-9)下进行,以促进偶联反应。

  3. 聚合反应:

    • 将肌动蛋白稀释至适当浓度(例如1-10 mg/mL),并在合适的缓冲液中(如PBS)中准备。

    • 将FITC溶液缓慢加入肌动蛋白溶液中,轻轻混合。

  4. 反应时间:

    • 在室温下反应1-4小时,具体时间可根据实验条件优化。

  5. 聚合形成F-actin:

    • 将标记的肌动蛋白转化为F-actin,通过在合适的条件下(如高盐、ATP的存在)诱导聚合。

  6. 纯化:

    • 通过透析、离心或凝胶过滤去除未反应的FITC和小分子杂质,收集FITC标记的F-actin。

  7. 表征:

    • 使用荧光显微镜、HPLC或其他适当的技术对标记产物进行纯度和结构的表征。

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