中文名称:荧光素修饰转铁蛋白
英文名称: FITC-transferrin
荧光素修饰的转铁蛋白 是一种将荧光染料(如 FITC,荧光异硫氰酸盐)结合到转铁蛋白上的试剂,广泛用于细胞生物学和生物化学研究。
荧光素修饰的转铁蛋白
荧光素修饰 是通过将荧光染料共价结合到转铁蛋白上,实现可视化标记。这种标记使得转铁蛋白可以通过荧光显微镜或流式细胞仪等设备进行检测和分析。
常用荧光染料
FITC(荧光异硫氰酸盐): 激发波长约为 495 nm,发射波长约为 519 nm。FITC 是最常用的染料之一,具有良好的荧光稳定性。
Cy3: 激发波长约为 550 nm,发射波长约为 570 nm。提供橙色荧光,适用于多重标记。
Cy5: 激发波长约为 650 nm,发射波长约为 670 nm。提供红色荧光,用于长波长检测。
其他染料: 例如 Alexa Fluor 系列,也可以用于标记转铁蛋白。
修饰方法
标记反应:
化学反应: 荧光素标记通常通过荧光素的活性官能团(如异硫氰酸酯)与转铁蛋白的氨基或羧基反应进行。FITC 常通过其异硫氰酸酯形式与转铁蛋白的氨基形成共价键。
条件控制: 反应通常在适当的缓冲液中进行,以保护蛋白质的结构和功能。
纯化:
分离: 使用色谱技术(如凝胶过滤色谱、离子交换色谱)去除未反应的染料和副产物。
确认: 通过光谱分析(如 UV-Vis、荧光光谱)确认标记的荧光强度和标记效率。
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