外泌体标记亲脂性染料PKH-67(green)/PKH-26(red)
Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡,具有**的脂质双分子层结构;参与细胞之间的交流,物质的运输以及正常生理过程的维持,此外还与疾病的产生有关。
对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪,有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等。
外泌体染色的方法。
亲脂性染料:PKH-67(green)/PKH-26(red)
染料可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出荧光,主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。
相比于PKH-67,PKH-26具有更长的半衰期,标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。
将PKH67标记的神经细胞外泌体与b.End3 细胞共培养后的荧光图
亲脂性羰花青染料(carbocyanine dyes):DiI/DiD/DiO/DiR
DiI, DiO, DiD, DiR是一系列亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。这些环境敏感性荧光染料在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强。且具有消光系数高、极性依赖性、激发态寿命短等特点。一旦进入细胞膜后,可在整个细胞膜上扩散,**浓度时可以使整个细胞膜染色。
将DiI标记的外泌体注射入小鼠海马齿状回(DG)区,分别观察第3、6和20天的荧光结果,对比可以发现外泌体在皮质层发生了很大的迁移。
DiD
将DiD标记的外泌体与PC12细胞孵育3H后,共聚焦观察。
DiR
体内静脉注射DiR标记的外泌体,24H后进行成像观察,结果如上图所示。
DiO
使用ExoChip-chambers捕获不同样品中的exosome,然后使用DiO进行外泌体染色,通过观察荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析。
产品供应:
上述产品与相关检测、分离、抽提等相关服务均可提供,仅用于科研机构!
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