一、概述

Magarose-DEAE是一种弱阴离子交换磁珠，具有快速的磁响应性、丰富的离子交换能力和**蛋白结合能力。离子交换配基为二乙氨乙基（diethylaminoethyl，DEAE），该配基在pH 3-12的工作范围内仍然能够保持稳定的高蛋白结合能力。Magarose-DEAE磁珠无需对粗蛋白样品进行预处理（如：反复繁琐的离心，费时费力的过滤操作），此外，无需控制流速及柱压，不需要昂贵的层析设备。对熟练的操作者，在短时间内就能完成高纯度目的蛋白的提取，且能轻松实现多个样品的平行处理，实现高通量的蛋白纯化。

二、产品特性

中文

三、使用方法

1. 产品优势

   磁响应速度快，减少操作时间；

   磁珠具良好分散性和重悬性，提高操作的便捷性；

   配基具有良好的物理化学稳定性，提高了实验结果的可靠性及可重复性；

2. 操作流程（以纯化含BSA蛋白样品为例）

1)        磁珠预处理（平衡）：将磁珠漩涡振荡30 s，充分重悬；取一定量的25 %（v/v）磁珠悬液置于50 mL离心管中。磁分离，弃上清液，加入20 mL 平衡缓冲液洗涤磁珠3次，每次垂直混合2 min。

注：为获得目标蛋白的**回收率，实验者需加入过量磁珠，一般大于蛋白结合量的20%即可。对于含较低丰度目标蛋白的样品中，磁珠对目标蛋白的回收率会有所降低，因此要继续增大磁珠的用量；

2)        蛋白吸附：将预处理的磁珠加入含BSA蛋白的样品溶液中，漩涡振荡30 s，置于垂直混合仪混匀30~60 min，使样品和磁珠充分接触并吸附，然后进行磁分离，移弃上清液。

注：为更**的吸附结合物质，平衡缓冲液**含较低离子强度，选择pH值应至少与目标蛋白等电点相差一个pH单位，选定盐缓冲液pH波动在0.5 pH以内。目标蛋白与磁珠吸附时间与蛋白本身属性有关。

3)        磁珠洗涤：加入20 mL的平衡缓冲液，漩涡振荡重悬磁珠30 s后磁分离，移弃上清；该操作重复3次。

4)        蛋白洗脱：在上述完成磁珠洗涤的离心管中加入适量洗脱液进行蛋白洗脱。迅速重悬磁珠，然后将离心管置于垂直混合仪混匀10~15 min后磁性分离，收集上清液至新的离心管中。洗脱方式主要有高盐浓度洗脱（含1-2 M的NaCl的平衡缓冲液）和低pH洗脱（选择低于目标蛋白等电点的pH范围即可）两种。

5)        磁珠再生：一般用2 M NaCl溶液洗涤3~5次，然后用平衡缓冲液进行再平衡。磁珠多次使用后有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为保证磁珠使用效率，建议在位清洗（CIP）。

6)        在位清洗（CIP）：依次采用 1.0 M NaOH、70%乙醇或30%异丙醇、纯水洗涤磁珠2次；最后加入20%乙醇重悬磁珠，置于2~8℃保存。