一、概述

CNBr 琼脂糖磁珠是活化好的磁珠，它采用平均粒径为20~45 μm的6%高度交联琼脂糖凝胶，表面用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，用它合成的亲和填料，它避免蛋白之间位阻以及蛋白和填料的位阻干扰，使其同等配基下有更高载量，同时有更好的分辨率。由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒，抗体等大分子的物质，载量基本保持不变。可以在水相或者有机相中偶联。提供的该CNBr 琼脂糖磁珠已活化。

二、产品特性

注：磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值。

三、使用方法

1. 产品特点

   偶联条件温和(pH8~10、4~45°C、时间1~16小时)，偶联效率高(每1 mL磁珠可偶联18~30 mg BSA)。

   填料不需要处理，直接计算合适的量用于偶联。

   保存时间长，4~8 ℃可以保存一年半，-20℃可以保存2年，同时应该避免受潮。

   可偶联包含多糖，蛋白，核酸，抗体以及其他含有NH₂配基的物质，使用范围广。

2. 蛋白偶联操作步骤

以用该CNBr活化琼脂糖磁珠偶联牛血清白蛋白(BSA)为例：

1)        取BSA 100 mg溶解于10 ml的0.25 M碳酸钠缓冲液中，pH9.0。

2)        将磁珠用0.25 M碳酸钠缓冲液（pH9.0）溶胀后，吸取适量的磁珠，用上述缓冲液洗涤2次。

3)        将5 mL磁珠加入溶解后的BSA 溶液中混合，在摇床上振荡，25℃偶联6小时。

4)        然后加0.1M Tris-HCl，pH8.3，再反应6个小时封闭剩余的基团。

5)        偶联了BSA 的磁珠，用1 M NaCl 溶液洗3-5次，收集偶联后剩余的液体以及洗涤的溶液测定BSA 的总量，再用纯水洗涤磁珠3次，最后将磁珠保存在相应蛋白保存缓冲液中。

6)        BSA 的偶联量为25 mg/ml. 计算方法：BSA 的吸附载量=（G0—G1）/V。

G0：BSA 总使用量，单位：mg；

G1：偶联反应后未偶联的 BSA 的量，单位：mg；

V：填料的体积，单位：mL；

备注：该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白，均能获得很好的偶联效果。