一、概述

Epoxy 活化琼脂糖磁珠（Magarose-Epoxy）是的活化好的磁珠，它采用平均粒径为20-45μm 的6%高度交联琼脂糖凝胶，表面用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，用它合成的亲和磁珠，它避免蛋白之间位阻以及蛋白和填料的位阻干扰，使其同等配基下有更高载量，同时有更好的分辨率。由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒，抗体等大分子的物质，载量基本保持不变。可以在水相或者有机相中偶联，提供的该Epoxy 琼脂糖磁珠已经完全溶胀为即用凝胶磁珠。

二、产品特性

注：磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅作参考值。

三、使用方法

1. 产品特点

  偶联条件温和（pH8-10，温度4-45℃，时间1-16小时，可以在水相或有机相中偶联），偶联效率高（配基密度60-70 μmol/mL）。

  磁珠不需要处理，直接计算合适的量用于偶联，缩短时间。

  保存时间长，-20℃可以保存2年，不能够受潮。

  刚性强，流速快(300 cm/h，100 kpa)。

 可偶联含有氨基、巯基、羟基的多糖，蛋白，核酸，抗体等配基，应用范围广。

 偶联后制备的亲和填料寿命长，流速快，特异性高。

2. 蛋白偶联操作步骤

以用该Epoxy 琼脂糖磁珠偶联牛血清白蛋白（BSA）为例：

1)        取20 ml活化琼脂糖磁珠，磁分离，50ml去离子水洗涤三次。磁分离，去除上清。

2)        取BSA 100 mg 溶解于10 mL的pH9.0的 0.25M 碳酸钠缓冲液中。

3)        将BSA 溶液加入磁珠中混合，在摇床上振荡，25℃偶联6小时。

4)        然后加50 mg 甘氨酸，再反应6个小时封闭剩余的基团。

5)        偶联了BSA 的磁珠，用1 M NaCl 溶液洗3-5次，收集偶联后剩余的液体以及洗涤的溶液测定BSA 的总量，再用纯水洗涤磁珠3次，最后将磁珠保存在相应蛋白保存缓冲液中。

6)        BSA 的偶联量为25 mg/ml. 计算方法：BSA 的吸附载量=（G0—G1）/V。

G0：BSA 总使用量，单位：mg；

G1：偶联反应后未偶联的 BSA 的量，单位：mg；

V：填料的体积，单位：mL；

注：该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白，均能获得很好的偶联效果。偶联的物质如果是小分子的例如氨基酸或其他带-NH₂、-SH、-OH等基团的小分子配基，那可以直接把配基加到0.05M NaOH中配置成10-20mg的溶液，其他条件不变。也可以提高偶联的温度，这样可以偶联密度更高。