异硫氰酸荧光素(FITC)标记
异硫氰酸荧光素(FITC)具有永*性标记生物分子的独*检测性能,可用于检测或跟踪共轭物与其他生物分子的相互作用。FITC是荧光素的异硫氰酸酯衍生物,主要通过对其5-碳位下环的改性合成。FITC的异硫氰酸酯能与蛋白质或抗体的伯胺基发生反应,这种性质可用于标记。FITC的荧光特性包括在495nm处的吸光度和520nm的发射波长。
FITC标记抗体的原理
FITC异硫氰酸荧光素是目前较为常用的标记抗体的方法,FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶,性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下,FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上*多能标记15~20个FITC分子,被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力,在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光,通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析,从而对抗原进行定性、定位或定量。
FITC抗体标记注意事项
1.影响标记效率的因素有温度、时间、pH、荧光素和蛋白的量等,需注意控制;
2.荧光素及其标记抗体的操作过程注意避光,搅拌速度应适当避免气泡的产生;
3.层析柱装柱注意正确操作,使柱体均匀、柱面平整,无气泡、裂隙;
4.上样和洗脱应做到“前切”和“后切”。前切指柱顶缓冲液与凝胶平面相切时再加样品,后切指样品走至与凝胶平面相切时再加入洗脱缓冲液。
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶名称
中文名 木瓜蛋白酶
英文名 Papain
中文别名 木瓜酶 | 木瓜蛋白酶 | 木瓜胶液
分子式 C19H29N7O6
分子量 451.477
FITC标记的*点及应用
在众多的荧光染料中,FITC以其高吸收率、*异的荧光量子产率和良好的水溶性而成为*受欢迎的荧光染料之一。与其他荧光素衍生物一样,FITC可以产生可检测信号,而无需额外的检测试剂。这一特性使得FITC在检测蛋白质或抗体的位置和激活、识别蛋白质或抗体复合物的形成和构象变化以及监测体内的生物过程方面具有**广泛的用途。由于这些*点,FITC已经被广泛应用。FITC标记的抗体可以检测细胞、组织切片和western blots中的抗原。用FITC标记分子在电泳分离后检测蛋白质和蛋白质及肽的微序列分析中也很有用。
我们提供以下产品的/活性基团改性/高分子或小分子组合或其他组合**:
蛋白酶K Protein A
凝血酶Thrombin
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溶酶体蛋白水解酶Cathepsin B
人端粒酶逆转录酶(hTERT)
辣根过氧化物酶
胰蛋白酶
蛋白激酶B
酪氨酸酶
基质金属蛋白酶2(MMP2)
产地 :西安
纯度:99%
用途:仅用于科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
QY小编 ysl 2022.5.31