异硫氰酸荧光素（FITC）标记

FITC标记抗体的原理

FITC异硫氰酸荧光素是目前较为常用的标记抗体的方法，FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶，性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下，FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上多能标记15~20个FITC分子，被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力，在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光，通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析，从而对抗原进行定性、定位或定量。

5-乙炔基-2'-脱氧尿苷

5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)名称

中文名 5-乙炔-2-脱氧尿苷

英文名 5-Ethynyl-2′-deoxyuridine, (EdU)

中文别名 5-乙炔基-2-脱氧尿苷 | 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 | 5-乙炔基-2‘-去氧尿苷

描述 5-Ethynyl-2'-deoxyuridine 是一种 PROTAC linker，属于 alkyl chain 类。可用于合成 PROTAC 分子

分子式 C11H12N2O5

分子量 252.22300

FITC抗体标记注意事项

1.影响标记效率的因素有温度、时间、pH、荧光素和蛋白的量等，需注意控制；

2.荧光素及其标记抗体的操作过程注意避光，搅拌速度应适当避免气泡的产生；

3.层析柱装柱注意正确操作，使柱体均匀、柱面平整，无气泡、裂隙；

4.上样和洗脱应做到“前切”和“后切”。前切指柱顶缓冲液与凝胶平面相切时再加样品，后切指样品走至与凝胶平面相切时再加入洗脱缓冲液。

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QY小编 ysl 2022.5.30