多肽

荧光染料标记的多肽用于生物体内生物医学成像、蛋白结合和定位等的研究。荧光素可以直接和多肽的N端直接相连（异硫氰酸荧光素的连接， 通常在多肽的N端和异硫氰酸荧光素直接插一个氨基乙酸或者β-丙氨酸。），或者在C端和赖氨酸（或半胱氨酸）的侧链连接、或者在其它可以连接的位子连接。

异硫氰酸荧光素（FITC）标记

异硫氰酸荧光素（FITC）具有永久性标记生物分子的独特检测性能，可用于检测或跟踪共轭物与其他生物分子的相互作用。FITC是荧光素的异硫氰酸酯衍生物，主要通过对其5-碳位下环的改性合成。FITC的异硫氰酸酯能与蛋白质或抗体的伯胺基发生反应，这种性质可用于标记。FITC的荧光特性包括在495nm处的吸光度和520nm的发射波长。

FITC标记抗体的原理

FITC异硫氰酸荧光素是目前较为常用的标记抗体的方法，FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶，性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下，FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上多能标记15~20个FITC分子，被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力，在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光，通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析，从而对抗原进行定性、定位或定量。

FITC抗体标记注意事项

1.影响标记效率的因素有温度、时间、pH、荧光素和蛋白的量等，需注意控制；

2.荧光素及其标记抗体的操作过程注意避光，搅拌速度应适当避免气泡的产生；

3.层析柱装柱注意正确操作，使柱体均匀、柱面平整，无气泡、裂隙；

4.上样和洗脱应做到“前切”和“后切”。前切指柱顶缓冲液与凝胶平面相切时再加样品，后切指样品走至与凝胶平面相切时再加入洗脱缓冲液。

西安齐岳生物科技有限公司可以提供各种荧光染料标记的多肽，抗体蛋白和多糖类产品,如果有需要可以联系我们。

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QY小编 ysl 2022.5.30