小干扰RNA(SiRNA)是一种强有力的基因沉默工具,已被应用于生物医学领域,通过本文介绍了一种血小板细胞膜包裹的金属-有机骨架(MOF)纳米递送平台,用于体内靶向递送siRNA。
设计思路
▪将六水合硝酸锌,2-甲基咪唑溶液及相应的siRNA通过一锅法制备MOF。
▪该MOF结构具有pH响应的性质,同时由于咪唑基团的存在起到了“质子海绵”效应,能够实现溶酶体逃逸。
▪提取的血小板通过反复冻融获取细胞膜,然后加入MOF溶液中通过挤出的方式进行胞膜。
示意图
MOF核心具有很高的载量,其对pH的敏感性使细胞摄取时的内体破坏成为可能。细胞膜涂层提供了一种与疾病底物进行生物接触的自然方式。
P-MOF-siRNA的表征
物化表征
▪图A粒径测量。终的P-MOF-siRNA粒径约为175nm。
▪图BZeta电势测量。MOF本身为正电性,包裹细胞膜后呈现负电性。
▪图CTEM表征。呈现均匀的球形,且密度较高的MOF结构外面能观察到有一层细胞膜包裹。
▪图D包封率测量。MOF能够包载多达500nM的siRNA。制剂终处方:500nMsiRNA,20mg/ml2-methylimidazole,and1mg/mlzincnitratehexahydrate
▪图E稳定性考察。在PBS和含血清的基质中,制剂组能够保持长达8天的形态稳定性。
▪图F释放实验。考察制剂在不同pH条件下的释放动力学,酸性条件下能够实现siRNA的快速释放。
▪图G、HsiRNA保护考察。将制剂与RNase或含血清的基质共孵育能**保护siRNA免受酶或血清组分的降解。
▪图I血小板膜表征。WB实验考察制剂组包膜含有正常血小板表面的关键蛋白。
▪图J包膜方向性考察。通过斑点印记实验表明,靶向关键分子CD47约有80%位于膜外表面,证明包膜方向正确。
结果表明,在体外可以对多个靶基因获得较高的沉默效率。使用小鼠异种移植模型,观察到**的抗**靶向性效果。
总体而言,本文提出的仿生纳米递送系统提供了一种在体内实现基因沉默的**手段,并可用于扩大siRNA在一系列与疾病相关的应用中的适用性。
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MIL-68(Al)金属有机骨架
MIL-68(Fe),cas1251849-13-4
PCN-250(Fe2Co),cas2393906-70-0
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以上资料来自小编axc,2022.03.07
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