编码基因的敲除，技术服务

编码基因的敲除是一种重要的分子生物学技术，旨在通过特定的方法使生物体中的某个特定编码基因失去功能。这种技术在基因功能研究、疾病模型构建以及生物制药等领域都有着广泛的应用。

编码基因敲除的方法主要包括传统的基因打靶技术和新兴的 CRISPR/Cas9 技术等。传统基因打靶技术通常依赖于同源重组，通过将含有特定基因突变的 DNA 片段导入细胞，利用细胞自身的同源重组机制替换目标基因，实现基因敲除。然而，这种方法操作复杂、效率较低。CRISPR/Cas9 技术则凭借其高效、简便的特点迅速成为基因敲除的主流方法。该技术利用 Cas9 核酸酶在向导 RNA（gRNA）的引导下，特异性地识别并切割目标基因序列，造成双链断裂，随后细胞通过非同源末端连接或同源重组修复机制对断裂的 DNA 进行修复，从而实现基因敲除。

编码基因敲除的意义重大。在基因功能研究方面，通过敲除特定编码基因，可以观察生物体在该基因缺失后的表型变化，从而推断该基因的功能。例如，敲除与疾病相关的基因，可以研究该基因在疾病发生发展中的作用。

然而，编码基因敲除也面临一些挑战。一方面，可能会出现脱靶效应，即 Cas9 核酸酶在非目标位点进行切割，导致非预期的基因改变。为了减少脱靶效应，可以通过优化 gRNA 的设计、提高 Cas9 核酸酶的特异性等方法。另一方面，基因敲除可能会对生物体产生不可预测的影响，甚至可能导致生物体死亡。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

产品：

慢病毒介导的表达绿色荧光蛋白(GFP)

抑制绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体的构建

利用重组慢病毒载体建立稳定表达绿色荧光蛋白细胞系

慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞

慢病毒介导BMP一2过表达质粒

哺乳动物细胞慢病毒表达载体

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。