利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰小鼠模型，基因敲除的定制服务

首先，需要设计针对目标基因的 sgRNA。通过对目标基因的序列进行分析，选择合适的位点进行编辑。这些位点通常位于基因的编码区或调控区。然后，将 sgRNA 与 Cas9 蛋白的表达载体构建好。

接下来，通过显微注射等方法将 sgRNA - Cas9 载体导入小鼠的受精卵中。Cas9 蛋白在 sgRNA 的引导下，对受精卵中的目标基因进行切割，产生 DNA 双链断裂。细胞自身的修复机制会对断裂的 DNA 进行修复，可能会导致基因的插入、缺失或替换等突变。

在受精卵发育成胚胎并植入代孕母鼠体内后，出生的小鼠中就可能存在基因修饰的个体。为了筛选出成功修饰的小鼠，需要采用多种方法进行鉴定。例如，可以通过 PCR 扩增目标基因区域并进行测序，以确定是否存在基因突变。还可以通过检测蛋白质表达水平或观察小鼠的表型变化来验证基因修饰的效果。

利用 CRISPR/Cas9 技术构建的基因修饰小鼠模型可以用于研究基因的功能。通过敲除或敲入特定的基因，可以观察小鼠在生长发育、生理功能、疾病易感性等方面的变化，从而深入了解基因在生命活动中的作用。

此外，基因修饰小鼠模型还可以用于模拟人类疾病。例如，通过敲除与人类疾病相关的基因，可以构建疾病模型，为研究疾病的发病机制和开发新的治疗方法提供重要的工具。

齐岳生物生物提供的基因敲入细胞定制服务，包括荧光蛋白定点敲入、蛋白标签定点敲入、基因敲入等。通过核转染法将 CRISPR/Cas9 系统的 gRNA 载体（含 Cas9）与携带目的片段的 Donor 共转入细胞中，在 gRNA 和 Cas9 复合物造成靶位点 DNA 双链断裂后，细胞以 Donor 作为模板进行同源重组修复（HDR）实现目的片段的定点敲入。客户可以根据自己的需求选择不同的服务类型。

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西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。