CRISPR/Cas9系统基因敲除个别外显子,技术服务
CRISPR/Cas9 系统在基因敲除个别外显子方面同样发挥着重要作用。
当需要对特定基因的个别外显子进行敲除时,CRISPR/Cas9 系统可以通过设计针对性的 sgRNA 来实现的基因编辑。sgRNA 引导 Cas9 蛋白在目标外显子的特定位置进行切割,细胞通过 DNA 修复机制产生突变,从而使该外显子失去功能。
这种精准的基因敲除在研究基因的结构与功能关系方面具有独特价值。例如,某些基因的特定外显子可能与特定的生物学功能相关,通过敲除该外显子,可以深入了解其在基因表达和蛋白质功能中的作用。
在操作过程中,需要仔细选择 sgRNA 的靶点,确保其特异性和准确性。同时,对编辑后的细胞进行细致的检测和分析,以确认目标外显子被成功敲除且没有产生非预期的突变。此外,还可以结合其他分子生物学技术,如 PCR、测序和蛋白质分析等,进一步验证基因敲除的效果。
总之,CRISPR/Cas9 系统为基因敲除个别外显子提供了一种高效、精准的手段,有助于深入研究基因的功能和疾病机制。
RISPR/Cas9文库
全基因组sgRNA文库可同时对多个细胞的不同基因进行编辑,之后,辅以特定的筛选方案,通过功能性筛选和富集、PCR扩增、NGS测序和生信分析等手段,可确认符合条件的相关基因。
由于基因组序列中原间隔序列邻近模块序列(protospacer adjacent motif,PAM)的广泛存在,运用CRISPR/Cas9技术基本能实现对基因组中所有基因的编辑。CRISPR/Cas9 sgRNA文库结合高通量筛选技术具有广泛的应用前景,既可以在全基因组范围筛选发现新靶点,还可以快速地找到与某种表型相关的基因或基因群。
西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括:
(1)过表达质粒构建;
(2)诱导基因的定点突变;(单碱基突变,多碱基突变)
(3)构建基因截短体质粒;
(4)亚克隆质粒构建;
(5)通过慢病毒介导的基因过表达;
(6)通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减
(7)通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除
注意事项:
本产品仅供科研使用,严禁用于人体或其他非科研用途。
使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛。
请按照相关文献和相关安全规定进行操作,避免误用或滥用。