HeLa细胞系敲除NSUN2基因，实验外包

HeLa 细胞系是源自人类宫颈癌的细胞系，应用于生物学和医学研究。NSUN2 基因是一种甲基转移酶，参与多种 RNA 的甲基化修饰，对基因表达调控具有重要意义。

利用基因敲除技术敲除 HeLa 细胞中的 NSUN2 基因，能够深入探究该基因在细胞生物学过程中的作用。借助 CRISPR/Cas9 等先进技术，设计针对 NSUN2 基因的 sgRNA 并导入 HeLa 细胞，实现基因敲除。

NSUN2 基因敲除后，HeLa 细胞可能会出现一系列变化。RNA 的甲基化修饰水平会显著下降，影响基因的表达调控。这可能导致细胞周期进程的改变、细胞增殖能力的变化以及细胞凋亡的调控异常。此外，NSUN2 基因敲除还可能影响细胞对环境应激的反应，为深入理解宫颈癌的发生发展机制提供新的线索，也为宫颈癌的诊断和治疗提供潜在的靶点。

CRISPR/Cas9基因敲除

Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制，其中II型CRISPR/Cas免疫系统依赖Cas9内切酶家族靶向和剪切外源DNA。在这一系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA，其中Cas9的HNH核酸酶结构域剪切互补链，其RuvC-like结构域剪切非互补链。

运用该技术成功获得斑马鱼等模式动物基因敲除模型，使得多个基因敲除、敲入成为可能。

作为一种新的基因编辑技术，CRISPR/Cas9有以下特点和优势：

1、靶向精确性更高。RNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配，Cas9才会对DNA进行剪切。

2、可实现对靶基因多个位点同时敲除。

3、实验周期短，仅需2个月，节省大量时间和成本。

4、无物种限制。

西安齐岳生物可提供的质粒构建服务包括：

（1）过表达质粒构建；

（2）诱导基因的定点突变；（单碱基突变，多碱基突变）

（3）构建基因截短体质粒；

（4）亚克隆质粒构建；

（5）通过慢病毒介导的基因过表达；

（6）通过构建shRNA慢病毒质粒实现基因的敲减

（7）通过CRISPR-Cas9技术实现基因敲除

注意事项：

本产品仅供科研使用，严禁用于人体或其他非科研用途。

使用过程中请佩戴手套和护目镜等防护用品，避免直接接触皮肤和眼睛。

请按照相关文献和相关安全规定进行操作，避免误用或滥用。